臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)又稱PCR實(shí)驗(yàn)，是專門用來檢驗(yàn)艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一種檢測手段。它可以通過將病毒體內(nèi)所含的基因進(jìn)行擴(kuò)增的方法，測出一些病毒含量不高的感染者體內(nèi)是否含有特定的病毒。由于該檢測方法可以測出普通檢驗(yàn)難以檢測出的病毒并具有靈敏度高、特異性高、快捷、對樣品要求低等優(yōu)點(diǎn)，因此被臨床醫(yī)生廣為認(rèn)可，已廣泛應(yīng)用于醫(yī)院的臨床診斷和各防疫檢測部門的禽疫病診斷。
但是，這種實(shí)驗(yàn)需要有能保證絕對安全、配置合理的實(shí)驗(yàn)室和非常規(guī)范的操作為前提。
近年來對臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室（以下簡稱“PCR實(shí)驗(yàn)室”）的建設(shè)越來越得到重視，因?yàn)樗鼘z測結(jié)果的可靠性、準(zhǔn)確性和安全性起到至關(guān)重要的作用。
PCR實(shí)驗(yàn)室平面布局
臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室原則上分為四個單獨(dú)的工作區(qū)域：試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。為避免交叉污染，進(jìn)入各個工作區(qū)域必須嚴(yán)格遵循單一方向進(jìn)行，即只能從試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。各實(shí)驗(yàn)區(qū)之間的試劑及樣品傳遞應(yīng)通過傳遞窗進(jìn)行。
1.試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū):此區(qū)域的作用是貯存試劑的制備、試劑的分裝、主反應(yīng)混合液的制備。注意事項(xiàng)是實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目所使用的材料，如試劑與試劑原材料，標(biāo)本與標(biāo)本原材料等，這些都必須存放于本區(qū)內(nèi)。至于是否需要控制氣流壓力，本區(qū)倒是沒有嚴(yán)格要求。
2.標(biāo)本制備區(qū):此區(qū)域的作用是臨床標(biāo)本的保存、核酸(RNA與DNA)的提取與貯存、核酸加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測定RNA時DNA的合成。注意事項(xiàng)是為了防止鄰近區(qū)域的空氣進(jìn)入本區(qū)，壓力梯度對比鄰近區(qū)域要設(shè)置成正壓。進(jìn)行實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的操作時，工作人員要避免不必要的走動，以防止加樣操作中發(fā)生氣溶膠污染。
3.擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū):此區(qū)域的作用是DNA擴(kuò)增、把制備的實(shí)驗(yàn)試劑做成反應(yīng)混合液。注意事項(xiàng)是實(shí)驗(yàn)擴(kuò)增的污染指數(shù)比較高，壓力梯度對比鄰近區(qū)域要設(shè)置成負(fù)壓，這樣做的好處是能有效防止氣溶膠從本區(qū)泄漏。
4.擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū):此區(qū)域的作用是測定相關(guān)擴(kuò)增片段。注意事項(xiàng)是實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)時如果已經(jīng)預(yù)設(shè)了全自動封閉分析儀器，那么就沒有必要再劃分本區(qū)了。本區(qū)的壓力梯度對比鄰近區(qū)域要設(shè)置成負(fù)壓，這樣做的好處是能有效防止擴(kuò)增產(chǎn)物擴(kuò)散至其它區(qū)域。
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