標準PCR實驗室的注意事項:
①各個工作區(qū)標志需要明確落實,避免不同實驗區(qū)域內(nèi)設(shè)備或材料物品交叉濫用,導(dǎo)致污染;
②在不同的區(qū)域內(nèi)工作,實驗人員需著各自對應(yīng)的實驗工作服,在離開工作區(qū)域時,便不得將工作服帶出工作區(qū)域;
③進入各個工作區(qū)域內(nèi)必須保證單一方向操作,即試劑準備區(qū)→標本制備區(qū)→PCR擴增區(qū),不得逆向流動;
④燈具方面:需選用凈化燈具,能達到便于清洗、不積塵的目的。在三個試驗工作區(qū)和三個緩沖區(qū)頂部及傳送窗內(nèi)部都裝有紫外燈,以便消毒。在試劑預(yù)備區(qū)和標本制備區(qū)還裝置移動紫外線燈,對試驗桌進行部分消毒。紫外燈波長為254mm,每20m一支40W的紫外燈。
⑤氣流方面:為防止環(huán)境對擴增產(chǎn)物的影響,各實驗區(qū)的氣流方向設(shè)置為:空氣由試劑準備區(qū)流向緩沖區(qū),標本制備區(qū)流向緩沖區(qū),緩沖區(qū)流向PCR擴增區(qū);
工作時,應(yīng)使緩沖區(qū)和PCR擴增區(qū)為負壓,其它各室為“0”壓或“+”壓。各區(qū)域之間應(yīng)具備單間的實驗工藝流,物流,人流與氣流,形成單向流程的保護屏障,避免實驗室之間的相互干擾,防止氣溶膠擴散對實驗過程造成污染。PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求,但是為避免各個實驗區(qū)域交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式,嚴格控制送風(fēng)排風(fēng)的比例,以保證個實驗區(qū)的壓力適宜。

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