1.陽性質(zhì)控品
較常見，發(fā)生概率在40%~60%之間；以重組質(zhì)粒作為陽性質(zhì)控品，發(fā)生污染的概率更大；以構(gòu)建的假病毒或重組病毒作為陽性質(zhì)控品，參與核酸提取的過程中，也容易發(fā)生氣溶膠污染；在試劑的配制過程中，接觸了污染的容器、移液器、槍頭、溶液，核酸氣溶膠等，導(dǎo)致試劑被污染。這是目前實驗室引起的核酸污染最主要原因。
2.PCR擴增產(chǎn)物
尤其是第一代PCR技術(shù)，發(fā)生概率在60%以上；PCR產(chǎn)物經(jīng)反復(fù)多次的擴增，其復(fù)制量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過PCR的檢測極限。一個氣溶膠所包含的拷貝數(shù)可以在10^4~10^6copies，因此即使是極微量的污染也足以造成實驗結(jié)果假陽性。但是，在采用了UNG/UDG防污染的PCR產(chǎn)品中，擴增產(chǎn)物引起的污染概率降至10%左右。
PCR擴增管的密封性是預(yù)防擴增產(chǎn)物污染的關(guān)鍵。如果密封不嚴(yán)，擴增完成后有蒸發(fā)現(xiàn)象，液面不整齊，或者擴增過程中有“炸管”聲音。
3.待測強陽性樣品
發(fā)生概率在10%~30%之間。放置樣品的容器被污染或由于容器密封不嚴(yán)導(dǎo)致樣品與外界接觸被污染;待提取樣本中含有強陽性樣本，其提取的樣品中含有高濃度的陽性核酸，形成氣溶膠造成污染。
氣溶膠是由空氣與液體表面摩擦而產(chǎn)生的。開蓋、晃動、加樣器的反復(fù)抽吸等開放式操作，形成核酸氣溶膠從而導(dǎo)致核酸污染。
以上核酸污染來源，均可形成氣溶膠擴散至空氣中，或直接吸附到物體表面。因此，應(yīng)尤其重視由氣溶膠導(dǎo)致污染的問題。重度污染假陽性的ct值可在24左右，中度污染ct值在30左右；輕度污染ct值在33左右。
從核酸污染的分布來看主要在2個地方：
1、空氣中的核酸氣溶膠污染物：彌散到實驗室各個角落，比較棘手；
2、物表的核酸污染物：移液器、離心機、核酸提取儀、傳遞窗、PCR儀、拆開的試劑盒、槍頭盒、打開的耗材等表面。
如有需要可直接撥打電話：13357726918（微信同號）
如需關(guān)注更多有關(guān)核酸檢測實驗室建設(shè)知識，請關(guān)注網(wǎng)站：http://www.www227zh.com/
關(guān)注我一對一咨詢！
關(guān)注公眾號獲取更多知識！
